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公開番号2025114665
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-08-05
出願番号2025075678,2021564879
出願日2025-04-30,2020-04-14
発明の名称胃がんを診断するためのmiRNAマーカーの組み合わせ物、およびキット
出願人ミレックサスラボプライヴェートリミテッド,MIRXES LAB PTE.LTD.
代理人個人,個人,個人,個人,個人,個人
主分類C12Q 1/6886 20180101AFI20250729BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】胃がんを容易に、効果的に、そして非侵襲的に診断することができる、miRNAマーカーの組み合わせ物およびキットを提供する。
【解決手段】胃がんを診断するためのmiRNAマーカーの組み合わせ物には、hsa-miR-29c-3p、hsa-miR-424-5p、hsa-miR-103a-3p、hsa-miR-93-5p、hsa-miR-181a-5p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-140-5p、hsa-miR-30e-5p、hsa-miR-142-5p、hsa-miR-126-3p、hsa-miR-183-5p、およびhsa-miR-340-5pから選択される、少なくとも4つのマーカーが含まれる。胃がんを診断するためのマーカーの組み合わせ物は、胃がん患者の血清と健康なヒトの血清とを区別するために用いることができる。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐ、から選択される、少なくとも５つのｍｉＲＮＡマーカーを含むことを特徴とする、胃がんを診断するための末梢血ｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
続きを表示（約 1,700 文字）【請求項２】
ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項３】
ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項４】
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項５】
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項６】
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項７】
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項８】
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡ
マーカーの組み合わせ物。
【請求項９】
ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐから成ることを特徴とする、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物。
【請求項１０】
ａ．被験者の末梢血サンプルにおいて、請求項１に記載のｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物の発現レベルを検出すること、
ｂ．非がんコントロールサンプルを基準として、前記被験者のリスクスコアを算出し、補正すること、および
ｃ．前記リスクスコアに基づいて、被験者が胃がんに罹患する可能性を決定すること、を含む、
胃がんに罹患しているリスクのある被験者を特定するための方法。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１９年４月３０日に中国特許庁に出願され、「胃がんを診断するためのｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物、およびキット」と題された出願番号201910392316.2の中国特許出願の優先権を主張し、その全内容は、参照することにより本出願に組み込まれる。
続きを表示（約 2,700 文字）【０００２】
技術分野
本発明は、分子生物学の分野にあり、特に、胃がんを診断するための、ｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物およびキットに関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
胃がんは世界でもっとも一般的な悪性腫瘍の一つであり、死亡率が最も高い悪性腫瘍の一つである。胃がん患者の大部分は、診断を受けるときには、診断や治療に最適なタイミングを見逃しており、結果として疾患の進行、腫瘍の転移、そして末期段階への進行にすら至る。胃がんのＴＭＮ分類の観点から、胃がんの５年生存率は、ステージＩの初期で９７．６％、ステージＩの後期で９４．９％、ステージＩＩで７０．４９％、ステージＩＩＩの初期で５６．７％、ステージＩＩＩの後期で３１．９％、そしてステージＩＶで６．５％である。早期胃がんの診断が必要であることが理解できる。
【０００４】
内視鏡（胃鏡）は、現在、胃がんを診断するための最も有益なツールである。早期の胃がんの内視鏡的兆候としては、異常な粘膜の色、粘膜表面における血管の消失、粘膜層における隆起の陥没または肥厚、不規則な結節、および潰瘍の周りの異常な粘膜のひだが挙げられる。必要に応じて、生検のために組織の一部は切除されうる。血液中のタンパク質マーカーの検出は、胃がんの診断の基準として使用されうる。胃がんに対して一般的に使用される腫瘍タンパク質マーカーとしては、例えば、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、炭水化物抗原１９－９（ＣＡ１９－９）、炭水化物抗原７２－４（ＣＡ７２－４）および炭水化物抗原５０（ＣＡ５０）ならびに胃のプロテアーゼ等が挙げられる。
【０００５】
内視鏡検査後の生検は、胃がん検出のためのゴールドスタンダードである。しかしながら、この方法は侵襲的であり、患者に不快感や恐怖心を引き起こしうる。加えて、無症状の患者は通常、内視鏡検査を受けない。従来の腫瘍タンパク質マーカーは、消化器がんの検出によく使用されるが、感度および／または特異性が不足しているため、胃がんの診断には推奨されない。
【０００６】
現在、組織、血清または血漿中におけるｍｉＲＮＡ腫瘍マーカーの検出は、胃がんの診断の基準として用いられる。ｍｉＲＮＡは、長さが約１９～２４ｎｔの、一種の小さなノンコーディング一本鎖ＲＮＡ分子である。大部分のｍｉＲＮＡは、標的遺伝子の３’ＵＴＲ領域との相補的結合により、標的遺伝子のタンパク質への翻訳を阻害し得、それにより、細胞、組織、または個体レベルにおける生物の成長と発達に影響を与え、様々な疾患の進行に関与する。ｍｉＲＮＡの発現プロファイルには明らかな組織特異性があり、さまざまな腫瘍において特異的な発現パターンを有する。これらの特徴は、ｍｉＲＮＡが腫瘍の診断のための新しい生物学的マーカーおよび治療標的となることを可能とする。ｑＰＣＲは、既知のｍｉＲＮＡの発現を検出するために最も一般的に使用される方法であり、早く、簡易であり、かつ再現性を有し、非常に高感度で正確な方法でｍｉＲＮＡの発現を定量的に分析でき、臨床応用において最も重要な方法である。これは、循環ｍｉＲＮＡに対して、腫瘍に対する非侵襲的な診断マーカーとしての確かな技術的保証を提供する。
【０００７】
既存の研究においては、胃がんの早期診断に対する多くの有望な血清ｍｉＲＮＡが見出されているが、これらの結果は一貫しておらず、相互に検証することができない。その理由は、さまざまな研究間において、サンプルの選択、採取、および保存の工程に一貫性がないことにある。異なる方法を用いて分離され、保存された末梢血サンプル中におけるバイオマーカーの含有量は異なる。個人間の体液環境、遺伝的特徴、およびその他の非がん性因子が、ｍｉＲＮＡの発現に影響を及ぼし、この影響を排除するためには多数の集団サンプルが必要である。加えて、ｍｉＲＮＡの検出はある程度の困難性を有する。したがって、最終的に胃がんの検診に用いることができる血清ｍｉＲＮＡバイオマーカーとバイオマーカーとの組み合わせ物は、まだ正確には決定されていない。
【発明の概要】
【０００８】
要旨
このことを鑑みて、本発明の目的は、胃がん患者の血清を健康なヒトの血清と区別し、さらに胃がん患者の血清を胃炎患者の血清から区別することで、胃がんを簡単に、効果的にそして非侵襲的に検出することができる、早期胃がんを診断するためのマーカーの組み合わせ物とキットを提供することである。
本発明の目的を達成するために、本発明は、以下の技術的解決策を採用する。
【０００９】
本出願人は、胃がんを検出するためのバイオマーカーおよび組み合わせ物として、ＲＴ－ｑＰＣＲ技術を用いて、１２のｍｉＲＮＡ、具体的にはｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３
ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐをスクリーニングおよび取得する。本発明に係るｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物は、４５６６人の被験者を試験するために用いられる。その結果は、ヘリコバクターピロリ検査およびペプシノーゲン検査と比較され、内視鏡検査の臨床的なゴールドスタンダード（ＡＵＣが０．８４）とよく一致しており、かつペプシノーゲンＩ／ＩＩ比およびヘリコバクターピロリ検査の、２つの既存のバイオマーカー（ＡＵＣが０．６２と０．６４）の各々よりも有意に優れている。
【００１０】
胃がんを診断するためのｍｉＲＮＡマーカーの組み合わせ物は、ｈｓａ－ｍｉＲ－２９ｃ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１０３ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９３－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－２１－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１８３－５ｐ、およびｈｓａ－ｍｉＲ－３４０－５ｐ、から選択される少なくとも４つのｍｉＲＮＡマーカーを含む。
（【００１１】以降は省略されています）

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