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公開番号2025094005
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-06-24
出願番号2025039014,2021570726
出願日2025-03-12,2020-05-28
発明の名称ApoE抗体、融合タンパク質、およびその使用
出願人ザジェネラルホスピタルコーポレイション,バナーヘルス,ザスケペンスアイリサーチインスティテュート,インコーポレイテッド
代理人個人,個人,個人
主分類C07K 19/00 20060101AFI20250617BHJP(有機化学)
要約【課題】ApoEのHSPG/ヘパリン結合親和性を調節する抗体、ペプチド、融合タンパク質、またはゲノム編集システムを用いて、認知症および/もしくは軽度認知障害に関連した認知低下ならびに/または神経変性を防止または処置するための方法および組成物を提供する。
【解決手段】野生型ApoEまたは変異体ApoEのHSPG結合性ドメインを含むポリペプチドに融合した抗体のFc領域を含むFc融合タンパク質であって、前記HSPG結合性ドメインが、特定のアミノ酸配列を含む、Fc融合タンパク質を提供する。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
野生型または変異体アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）の１つもしくは複数のＨＳＰＧ
結合部位、またはＨＳＰＧ結合のアロステリック調節の１つもしくは複数の部位と特異的
に結合する単離されたモノクローナル抗体。
続きを表示（約 1,700 文字）【請求項２】
ＴＥＥＬＲＶＲＬＡＳＨＬＲＫ（配列番号３）と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列
を有するポリペプチドと結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
ＴＥＥＬＲＶＳＬＡＳＨＬＲＫ（配列番号２）と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列
を有するポリペプチドと結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
野生型または変異体ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３、またはＡｐｏＥ４の１つまたは複数のＨ
ＳＰＧ結合部位と結合する、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項５】
抗体が、重鎖可変領域（ＶＨ）および軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む参照抗ＡｐｏＥ抗体
と同じエピトープと競合および／または結合し、前記参照抗体のＶＨおよびＶＬが
（ｉ）それぞれ、配列番号１３に示されたアミノ酸配列および配列番号１２に示されたア
ミノ酸配列；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号２３に示されたアミノ酸配列および配列番号２２に示された
アミノ酸配列；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号３３に示されたアミノ酸配列および配列番号３２に示され
たアミノ酸配列；または
（ｉｖ）それぞれ、配列番号４３に示されたアミノ酸配列および配列番号４２に示された
アミノ酸配列、
を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６】
抗体が、重鎖および軽鎖を含む参照抗ＡｐｏＥ抗体と同じエピトープと競合および／ま
たは結合し、前記参照抗体の重鎖および軽鎖が、配列番号５３に示されたアミノ酸配列お
よび配列番号５２に示されたアミノ酸配列を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の
抗体。
【請求項７】
ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびにＶＬＣＤＲ１
、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む抗ＡｐｏＥ抗体であって、ＶＨＣ
ＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ
３が、（ｉ）それぞれ、配列番号７、８、９、４、５、６；
（ｉｉ）それぞれ、配列番号１７、１８、１９、１４、１５、１６；
（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号２７、２８、２９、２４、２５、２６；
（ｉｖ）それぞれ、配列番号３７、３８、３９、３４、３５、３６；または
（ｖ）それぞれ、配列番号４７、４８、４９、４４、４５、４６
を含む、抗体。
【請求項８】
（ｉ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号１３および１２に示されたアミノ酸配列
と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％同一であるア
ミノ酸配列を含む；
（ｉｉ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号２３および２２と少なくとも７５％、８
０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む；
（ｉｉｉ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号３３および３２に示されたアミノ酸配
列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％同一である
アミノ酸配列を含む；または
（ｉｖ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号４３および４２に示されたアミノ酸配列
と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％同一であるア
ミノ酸配列を含む、
請求項７に記載の抗体。
【請求項９】
配列番号５３および５２に示されたアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％
、８５％、９０％、９５％、または１００％同一であるアミノ酸配列をそれぞれ含む重鎖
および軽鎖を含む、請求項７に記載の抗体。
【請求項１０】
マウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、またはＩｇＧ３重鎖定常領域
を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
優先権の主張
この出願は、２０１９年５月２８日に出願された米国仮特許出願第６２／８５３，６７
６号、および２０１９年７月１１日に出願された米国仮特許出願第６２／８７３，０１９
号の利益を主張する。前述の全内容は参照により本明細書に組み入れられている。
続きを表示（約 5,100 文字）【０００２】
連邦支援の研究または開発
この発明は、ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈにより授
与された助成金番号ＯＤ０１９８３３、ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｎ
Ａｇｉｎｇにより授与された助成金番号ＡＧ０５４６７１、ＡＧ０３１５８１、およびＡ
Ｇ１９６１０、ならびにＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＮｅｕｒｏｌｏ
ｇｉｃａｌＤｉｓｏｒｄｅｒｓａｎｄＳｔｒｏｋｅにより授与された助成金番号Ｎ
Ｓ１００１２１およびＮＳ１１００４８による政府支援でなされた。政府は本発明に一定
の権利を有する。
【０００３】
認知症および／または軽度認知障害に関連した認知低下を、アポリポタンパク質Ｅ（Ａ
ｐｏＥ）のヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）／グリコサミノグリカン（ＧＡＧ
）ヘパリン結合親和性を調節することにより防止または処置するための方法および組成物
が本明細書に記載される。
【背景技術】
【０００４】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、通常、ゆっくり始まって、時間と共に徐々に悪化する慢
性神経変性疾患である。それは、認知症の症例の６０～７０％の原因である。その疾患過
程は、脳におけるプラークおよび神経原線維変化に関連している。いくつかは一時的に症
状を改善し得るが、それの進行を停止しまたは逆転させる処置は現在、存在しない。脳に
おけるアミロイドβ（Ａβ）ペプチドの蓄積、凝集、および沈着は、アルツハイマー病（
ＡＤ）の病変形成の中心となる。ＡｐｏＥがＡβ凝集および代謝を調節することによりＡ
Ｄ病変形成に強く影響を及ぼすことは、増えてきた証拠により実証されている（Fu et al
., Mol Neurodegener 11:37, 2016）。ＡｐｏＥは、アミロイド生成、凝集、およびクリ
アランスに影響を及ぼし、アミロイド斑の構成要素であり、タウ媒介性神経変性を増悪さ
せる。ＡｐｏＥは２９９アミノ酸長であり、位置１１２および１５８におけるたった１個
または２個のアミノ酸によってお互いに異なる３つの主要なアレル（イプシロン２、イプ
シロン３、およびイプシロン４）：ＡｐｏＥ２（ｃｙｓ１１２、ｃｙｓ１５８）、Ａｐｏ
Ｅ３（ｃｙｓ１１２、ａｒｇ１５８）、およびＡｐｏＥ４（ａｒｇ１１２、ａｒｇ１５８
）を有する多型である。したがって、ＡＤおよび認知症または軽度認知障害に関連した認
知低下を処置または防止するためのＡｐｏＥタンパク質の機能をターゲットし、調節する
治療用物質の必要性がある。
【発明の概要】
【０００５】
一態様において、この開示は、野生型または変異体アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）
の１つもしくは複数（例えば、１、２、３、または４）のＨＳＰＧ結合部位、またはＨＳ
ＰＧ結合のアロステリック調節の１つもしくは複数（例えば、１、２、３、または４）の
部位と特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体を特徴とする。いくつかの実施形
態において、その抗体は、ＴＥＥＬＲＶＲＬＡＳＨＬＲＫ（配列番号３）と少なくとも９
５％（例えば、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％）同一のアミノ酸配列
を有するポリペプチドと結合する。いくつかの実施形態において、その抗体は、ＴＥＥＬ
ＲＶＳＬＡＳＨＬＲＫ（配列番号２）と少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９
８％、９９％、または１００％）同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドと結合する。
いくつかの実施形態において、その抗体は、野生型または変異体ＡｐｏＥ２、ＡｐｏＥ３
、またはＡｐｏＥ４の１つまたは複数（例えば、１、２、３、または４）のＨＳＰＧ結合
部位と結合する。
【０００６】
いくつかの実施形態において、抗体は、重鎖可変領域（ＶＨ）および軽鎖可変領域（Ｖ
Ｌ）を含む参照抗ＡｐｏＥ抗体と同じエピトープと競合および／または結合し、前記参照
抗体のＶＨおよびＶＬが、（ｉ）それぞれ、配列番号１３に示されたアミノ酸配列および
配列番号１２に示されたアミノ酸配列；（ｉｉ）それぞれ、配列番号２３に示されたアミ
ノ酸配列および配列番号２２に示されたアミノ酸配列；（ｉｉｉ）それぞれ、配列番号３
３に示されたアミノ酸配列および配列番号３２に示されたアミノ酸配列；または（ｉｖ）
それぞれ、配列番号４３に示されたアミノ酸配列および配列番号４２に示されたアミノ酸
配列、を含む。本明細書に記載された抗体のいずれかのいくつかの実施形態において、抗
体は、重鎖および軽鎖を含む参照抗ＡｐｏＥ抗体と同じエピトープと競合および／または
結合し、前記参照抗体の重鎖および軽鎖が、配列番号５３に示されたアミノ酸配列および
配列番号５２に示されたアミノ酸配列を含む。
【０００７】
別の態様において、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含むＶＨ、な
らびにＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３を含むＶＬを含む抗ＡｐｏＥ抗
体であって、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、ＶＨＣＤＲ３、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２
、およびＶＬＣＤＲ３が、（ｉ）それぞれ、配列番号７、８、９、４、５、６；（ｉｉ）
それぞれ、配列番号１７、１８、１９、１４、１５、１６；（ｉｉｉ）それぞれ、配列番
号２７、２８、２９、２４、２５、２６；（ｉｖ）それぞれ、配列番号３７、３８、３９
、３４、３５、３６；または（ｖ）それぞれ、配列番号４７、４８、４９、４４、４５、
４６、を含む。本明細書に記載された抗体のいずれかのいくつかの実施形態において、（
ｉ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号１３および１２に示されたアミノ酸配列と少
なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％同一であるアミノ
酸配列を含む；（ｉｉ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号２３および２２に示され
たアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００
％同一であるアミノ酸配列を含む；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＶＬが、それぞれ、配列番号３
３および３２に示されたアミノ酸配列と少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９
５％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む；または（ｉｖ）ＶＨおよびＶＬ
が、それぞれ、配列番号４３および４２に示されたアミノ酸配列と少なくとも７５％、８
０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％同一であるアミノ酸配列を含む。本明
細書に記載された抗体のいずれかのいくつかの実施形態において、抗体は、配列番号５３
および５２に示されたアミノ酸配列と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０
％、９５％、または１００％同一であるアミノ酸配列をそれぞれ含む重鎖および軽鎖を含
む。いくつかの実施形態において、抗体は、マウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、
ＩｇＧ２ｃ、またはＩｇＧ３重鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、抗体は
、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。いくつかの
実施形態において、抗体は、ヒトカッパまたはヒトラムダ軽鎖定常領域を含む。いくつか
の実施形態において、抗体は、全抗体、単一ドメイン抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、二
重特異性抗体、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディ、ナノボディ、Ｆａｂ、
またはＦ（ａｂ’）２である。いくつかの実施形態において、抗体は、半減期を延長する
部分をさらに含む。いくつかの実施形態において、抗体は、血液脳関門透過性部分をさら
に含む。いくつかの実施形態において、抗体は、検出可能な標識をさらに含む。いくつか
の実施形態において、本明細書に記載された抗体のいずれかを含む薬学的組成物が本明細
書で提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載された抗体のいずれかを
コードするポリヌクレオチドが本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、本
明細書に記載されたポリヌクレオチドを含むベクターが本明細書で提供される。いくつか
の実施形態において、本明細書に記載されたポリヌクレオチドまたは本明細書に記載され
たベクターを含む宿主細胞が本明細書で提供される。別の態様において、抗ＡｐｏＥ抗体
を作製する方法であって、（ａ）本明細書に記載された宿主細胞のいずれかを、前記抗体
の発現を可能にする条件下で培養するステップ、および（ｂ）前記抗体を単離するステッ
プを含む、方法が本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、方法は、ヒトへ
の投与に適した無菌製剤として抗体を製剤化するステップをさらに含む。
【０００８】
別の態様において、ＳＴＥＥＬＲＶＲＬＡＳＨＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲＤＡＤＤＬＱＫ（
配列番号５７）、ＳＴＥＥＬＲＶＳＬＡＳＨＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲＤＡＤＤＬＱＫ（配列
番号５８）、ＲＬＶＱＹＲＧＥＶＱＡＭＬＧＱＳＴＥＥＬＲＶＲＬＡＳＨＬＲＫＬ（配列
番号５９）、およびＲＬＶＱＹＲＧＥＶＱＡＭＬＧＱＳＴＥＥＬＲＶＳＬＡＳＨＬＲＫＬ
（配列番号６０）からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一のアミ
ノ酸配列を含む、野生型ＡｐｏＥまたは変異体ＡｐｏＥのＨＳＰＧ結合性ドメインを含む
、Ｆｃ融合タンパク質が本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、Ｆｃ融合
タンパク質は、ヒト抗体のＦｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒト抗体は、
ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４分子からなる群から選択される。い
くつかの実施形態において、本明細書に記載されたＦｃ融合タンパク質のいずれかを含む
薬学的組成物が本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載さ
れたＦｃ融合タンパク質をコードするポリヌクレオチドが本明細書で提供される。いくつ
かの実施形態において、本明細書に記載されたポリヌクレオチドのいずれかを含むベクタ
ーが本明細書で提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されたポリヌ
クレオチドまたは本明細書に記載されたベクターを含む宿主細胞が本明細書で提供される
。
【０００９】
別の態様において、（ｉ）ＳＴＥＥＬＲＶＲＬＡＳＨＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲＤＡＤＤＬ
ＱＫ（配列番号５７）、ＳＴＥＥＬＲＶＳＬＡＳＨＬＲＫＬＲＫＲＬＬＲＤＡＤＤＬＱＫ
（配列番号５８）、ＲＬＶＱＹＲＧＥＶＱＡＭＬＧＱＳＴＥＥＬＲＶＲＬＡＳＨＬＲＫＬ
（配列番号５９）、およびＲＬＶＱＹＲＧＥＶＱＡＭＬＧＱＳＴＥＥＬＲＶＳＬＡＳＨＬ
ＲＫＬ（配列番号６０）からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９５％同一
のアミノ酸配列を含む、野生型ＡｐｏＥまたは変異体ＡｐｏＥのＨＳＰＧ結合性ドメイン
、ならびに（ｉｉ）薬学的に許容されるアジュバントを含む、免疫応答を誘発するための
薬学的組成物が本明細書で提供される。
【００１０】
別の態様において、本明細書に記載された抗体のいずれかまたは本明細書に記載された
Ｆｃ融合タンパク質のいずれかを発現するヒト細胞を含む薬学的組成物が本明細書で提供
される。
（【００１１】以降は省略されています）

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