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公開番号2025088592
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-06-11
出願番号2023203380
出願日2023-11-30
発明の名称粒子、粒子の製造方法、検査粒子、試薬、キットおよび検出方法
出願人キヤノン株式会社
代理人個人,個人,個人,個人
主分類G01N 33/543 20060101AFI20250604BHJP(測定;試験)
要約【課題】リガンドを化学結合するための反応性官能基を有し、非特異的吸着が小さいラテックス凝集法用の粒子であって、静置保存した場合に分散安定性に優れる、即ち静置保存安定性に優れた検査粒子に用いることができるラテックス凝集法用の粒子を提供すること。
【解決手段】式(1)で示される構造単位Aと、式(2)で示される構造単位Bとを含む重合体を有し(式(1)と式(2)は明細書を参照)、比重が、1.00以上1.10以下の範囲であり、XPS測定により定量されるO元素に対するC元素の組成比が、2.1以上3.3以下の範囲である粒子である。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
式（１）で示される構造単位Ａと、式（２）で示される構造単位Ｂとを含む重合体を有し、
比重が、１．００以上１．１０以下の範囲であり、
ＸＰＳ測定により定量されるＯ元素に対するＣ元素の組成比が、２．１以上３．３以下の範囲である粒子。
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（式（１）のＲ
１
は、メチル基または水素原子を示す。Ｌ
１
は、炭素数が１以上４以下のアルキレン基を示す。Ｒ
２
は、スルフィド基または２級アミン、および、ヒドロキシ基を含む基である。式（２）のＲ
３
は、メチル基または水素原子を示す。Ｌ
４
は、炭素数が１以上４以下のアルキレン基を示す。Ｒ
４
は、スルフィド基または２級アミン、および、カルボキシ基を含む基である。）
続きを表示（約 1,400 文字）【請求項２】
さらに式（３）または式（４）で示される構造単位Ｃを有し、
前記構造単位Ａの量と前記構造単位Ｂの量と前記構造単位Ｃの量との合計量中の、前記構造単位Ａの量と前記構造単位Ｂの量との合計量が、５ｍｏｌ％以上４３ｍｏｌ％以下である請求項１に記載の粒子。
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41
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36
41
（式（３）のＲ
５
は、メチル基または水素原子を示す。式（３）のＲ
６
は、炭素数が１以上９以下の直鎖または分岐のアルキル基、または水素原子を示す。式（３）のｎは、１以上５以下の整数を示す。式（４）のＲ
７
は、メチル基または水素原子を示す。Ｒ
８
は、炭素数が１以上１２以下の直鎖または分岐のアルキル基を示す。）
【請求項３】
ゼータ電位が－５０ｍＶ以上－１０ｍＶ以下である請求項１に記載の粒子。
【請求項４】
前記構造単位Ｃが、スチレン類の群から選択される少なくとも一種である請求項２に記載の粒子。
【請求項５】
前記構造単位Ａの量と前記構造単位Ｂの量と前記構造単位Ｃの量との合計量中の、前記構造単位Ｃの量が、５７ｍｏｌ％以上９５ｍｏｌ％以下である請求項２に記載の粒子。
【請求項６】
示差走査熱量計（ＤＳＣ）測定における２回目の昇温時に得られるＤＳＣ曲線上において、温度が８０℃である前記ＤＳＣ曲線上の点と、温度が１００℃である前記ＤＳＣ曲線上の点とを通る直線を引き、１０５℃以上１４０℃以下の温度領域にある、前記直線と前記ＤＳＣ曲線との交点を交点Ａとするとき、前記ＤＳＣ曲線が、前記交点Ａの温度Ａｔと１００℃との間の温度領域に、吸熱ピークを有する請求項１に記載の粒子。
【請求項７】
前記構造単位Ａが、式（５）で示される構造を含有する請求項１に記載の粒子。
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62
101
（式（５）のＲ
１
は、メチル基または水素原子を示す。Ｌ
１
は、炭素数が１以上４以下のアルキレン基を示す。Ｌ
２
およびＬ
３
は、互いに独立に、単結合、および炭素数が１から３のアルキレン基のいずれかを示す。Ｘは、ＳまたはＮＨを示す。）
【請求項８】
前記構造単位Ｂが、式（６）で示される構造を含有する請求項１に記載の粒子。
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60
103
（式（６）のＲ
３
は、メチル基または水素原子を示す。Ｌ
４
は、炭素数が１以上４以下のアルキレン基を示す。Ｌ
５
は、単結合、および炭素数が１以上３以下のアルキレン基のいずれかを示す。Ｘは、ＳまたはＮＨを示す。）
【請求項９】
前記構造単位Ｃが、スチレンであることを特徴とする請求項２に記載の粒子。
【請求項１０】
水分散液中における体積平均粒子径が、２８０ｎｍ以上４００ｎｍ以下である請求項１に記載の粒子。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、粒子、粒子の製造方法、検査粒子、試薬、キットおよび検出方法に関する。
続きを表示（約 1,900 文字）【背景技術】
【０００２】
簡易・迅速な免疫検査方法としてラテックス凝集法が挙げられる。この方法では、標的物質に対して親和性のあるリガンドをラテックス粒子と結合して成る検査粒子の分散液と、標的物質を含有する可能性のある検体とを混合する。このとき、検体中に標的物質が含有されていれば、検査粒子が凝集反応を生じるため、この凝集反応を、散乱光強度、透過光強度、吸光度などの変化量として光学的に検出することで病気の診断をすることができる。
【０００３】
臨床検査における免疫検査項目では、標的物質が低濃度で存在する領域に診断上の重要なポイントをもつものが多く、標的物質が低濃度であってもその有無を判定できることが求められる。このような検出感度向上のための手段として、粒子径の大きいラテックス粒子を用いることで検出される吸光度などの変化量を大きくし、低濃度域の測定感度を向上させることが知られている。
【０００４】
また、ラテックス凝集法に用いる粒子、および粒子表面に標的物質に対するリガンドを有することを特徴とする検査粒子は、標的物質以外の物質と吸着する特性、いわゆる非特異的吸着が小さいことが望まれる。非特異的吸着の小さい粒子として、表面にポリグリシジルメタクリレートが配置された粒子が知られている。この粒子の表面に配置されたポリグリシジルメタクリレートは、グリシジル基の一部が開環し、グリコールを呈することにより、非特異的吸着が低減されると考えられている。特許文献１では、スチレンとグリシジルメタクリレートの共重合粒子において、ポリグリシジルメタクリレートが配置された粒子の表面に、ポリエチレングリコール鎖を介してリガンドを化学結合させたものを、バイオセパレーションに応用する事例が開示されている。
【０００５】
グリシジルメタクリレートのグリシジル基はまた、リガンドを粒子表面に化学結合するための反応性官能基としても用いることができる。リガンドの粒子表面への固定化に化学結合を用いることで、試薬を長期保存した際の、粒子表面からのリガンド脱離などの懸念が軽減される。特許文献２では、グリジジル基をカルボキシル化し、粒子表面にリガンドを化学結合するためのカルボキシ基を付与する事例が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
特開２０００－３５１８１４号公報
特開２００６－７１２９７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者らは、低濃度域の検出感度向上を目的として検討を行ったところ、特許文献１に記載されるようなスチレンとグリシジル（メタ）アクリレートの共重合粒子においては、粒子径をさらに大きくした場合、該粒子を用いた検査粒子における静置保管での粒子沈降が加速した。これは主に、比重が１より大きいグリシジル（メタ）アクリレートの配合量と粒子径の大きさの組み合わせに起因するものと予想される。
【０００８】
検査機関によっては検査粒子の分散液は数週間単位で静置保存される場合があるため、分散液中で検査粒子の分散状態を維持する工夫は重要な技術課題である。保存中に粒子沈降が生じると、検査時の分注精度が落ち、正確な測定が困難となる。
【０００９】
検査粒子の分散状態を維持するためには、粒子比重が重要になる。一般的に、体外診断用試薬の分散媒は水である。そのため、水の比重１．０と粒子比重の差が沈降レベルに大きく影響し、この場合、比重１．１の粒子と比重１．２の粒子を比較すると、沈降速度に２倍の差が生じる。沈降を軽減して分散安定性を維持するために、分散媒の比重や粘度を上げる成分の添加も行われているが、検出感度に影響する場合があり、特性のバランスを維持する技術が必要である。
【００１０】
非特異的吸着の低減や粒子表面へのリガンドの化学結合を目的に、粒子成分としてグリシジル（メタ）アクリレートを用いることが好ましい一方で、沈降を軽減して分散安定性を維持するためには、粒子中のグリシジル（メタ）アクリレートの配合比を少なくすることが必要と考えられる。しかしながら、単純に配合比を変えると共重合体粒子表面における存在比も変わるため、結合できるリガンド量が少なくなることで検出感度に制限が生じたり、表面のヒドロキシ基が少なくなることで非特異的吸着性が顕著に悪化したりすることがある。
（【００１１】以降は省略されています）

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