特許ウォッチ

公開番号2025072547
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-05-09
出願番号2025018703,2023506075
出願日2025-02-06,2021-06-11
発明の名称キメラ抗原受容体及びその用途
出願人個人,CENTER FOR EXCELLENCE IN MOLECULAR CELL SCIENCE, CHINESE ACADEMY OF SCIENCES
代理人弁理士法人はなぶさ特許商標事務所
主分類C07K 19/00 20060101AFI20250430BHJP(有機化学)
要約【課題】Y/F突然変異を有するCD3ε細胞内領域を含むか、CD3ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体及びその用途を提供する。
【解決手段】Y/F突然変異を有するCD3ε細胞内領域を含むキメラ抗原受容体の構造は、順に連結される細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインを含む。前記細胞内ドメインにおける膜貫通ドメインに連結される一端には、Y/F突然変異を有するCD3ε細胞内領域が連結されている。前記Y/F突然変異を有するCD3ε細胞内領域とは、CD3ε細胞内領域のITAMにおける2つのチロシンがいずれもフェニルアラニンに突然変異したY/F突然変異型CD3ε細胞内領域のことである。キメラ抗原受容体で改変したT細胞は、生存能力が向上し、アポトーシスレベルが低下し、増殖能力が向上し、サイトカインIFN-γ及びTNF-αの発現レベルが下方調節される。
【選択図】図1a
特許請求の範囲【請求項１】
ＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体であって、
順に連結される細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインを含み、
前記細胞外ドメインは抗原認識領域とヒンジ領域を含み、
前記細胞内ドメインにおける膜貫通ドメインに連結される一端にはＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフが連結されているキメラ抗原受容体。
続きを表示（約 1,900 文字）【請求項２】
更に、
（１）前記ＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフのアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：１０に示す通りであり、
（２）前記細胞内ドメインは、順に連結されるＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフ、共刺激シグナル伝達領域及びＣＤ３ζ細胞内セグメントを含む、
との特徴のうちの１つ又は複数を含むことを特徴とする請求項１に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体。
【請求項３】
前記共刺激シグナル伝達領域は、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、４－１ＢＢ、ＯＸ－４０及びＩＣＯＳのうちの１つ又は複数の細胞内セグメントから選択されることを特徴とする請求項２に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体。
【請求項４】
更に、
（１）前記ＣＤ２８の細胞内セグメントのアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：２に示す通りであり、
（２）前記ＣＤ３ζ細胞内セグメントのアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：３に示す通りである、
との特徴のうちの１つ又は複数を含むことを特徴とする請求項３に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体。
【請求項５】
更に、
ａ．前記抗原認識領域は、腫瘍表面抗原を標的とする一本鎖抗体から選択され、前記腫瘍表面抗原は、ＣＤ１９、メソテリン、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ１３８、ＢＣＭＡ、線維芽細胞活性化タンパク質（Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔａｃｔｉｖａｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ）、グリピカン－３（Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３）、ＣＥＡ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＰＳＭＡ、Ｈｅｒ２、ＩＬ１３Ｒα２、ＣＤ１７１及びＧＤ２のうちの１つ又は複数から選択され、
ｂ．前記膜貫通ドメインは、ＣＤ２８、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＯＸ４０又はＨ２－Ｋｂのうちの１つ又は複数の膜貫通領域から選択され、
ｃ．前記ヒンジ領域は、ＣＤ２８ヒンジ領域、ＣＤ８αヒンジ領域、ＣＤ４ヒンジ領域、免疫グロブリンＩｇＧのヒンジ領域、又は免疫グロブリンＩｇＧのヒンジ領域とＣＨ２ＣＨ３領域が連結したヒンジ領域のうちの１つ又は複数から選択される、
との特徴のうちの１つ又は複数を含むことを特徴とする請求項１に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体。
【請求項６】
更に、
ｄ．前記一本鎖抗体はＦＭＣ６３から選択され、
ｅ．前記ＣＤ２８の膜貫通領域のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：４に示す通りであり、
ｆ．前記ＣＤ２８ヒンジ領域のアミノ酸構造はＳＥＱＩＤＮＯ：７に示す通りである
、
との特徴のうちの１つ又は複数を含むことを特徴とする請求項５に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体。
【請求項７】
更に、
１）前記ＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体の抗原認識領域はＦＭＣ６３から選択され、ヒンジ領域はＣＤ２８ヒンジ領域から選択され、前記膜貫通ドメインはＣＤ２８の膜貫通領域から選択され、細胞内ドメインは、順に連結されるＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフ、ＣＤ２８の細胞内セグメント及びＣＤ３ζ細胞内セグメントを含み、
２）前記キメラ抗原受容体のアミノ酸配列はＳＥＱＩＤＮＯ：１１に示す通りである、
との特徴のうちの１つ又は複数を含むことを特徴とする請求項１～６のいずれか１項に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体。
【請求項８】
（１）請求項１～６のいずれか１項に記載のＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチド配列、及び
（２）（１）で述べたポリヌクレオチド配列の相補的配列、
から選択されるポリヌクレオチド配列。
【請求項９】
前記ポリヌクレオチド配列はＳＥＱＩＤＮＯ：１２に示す通りであることを特徴とする請求項８に記載のポリヌクレオチド配列。
【請求項１０】
請求項８に記載のポリヌクレオチド配列を含む核酸構築物。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、キメラ抗原受容体の分野に関し、具体的には、Ｙ／Ｆ突然変異を有するＣＤ３ε細胞内領域を含むか、ＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体及びその用途に関する。
続きを表示（約 2,100 文字）【背景技術】
【０００２】
キメラ抗原受容体は、ＣＡＲ（ｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒ）と略称され、特定の腫瘍抗原を標的とするＣＡＲが搭載されたＴ細胞をＣＡＲ－Ｔ細胞と称する。ＣＡＲ－Ｔ療法は、腫瘍の治療（特に、固形腫瘍の免疫療法）に幅広く応用されている。本療法は、腫瘍治療における新型の精密標的療法となっており、ここ数年は、最適化や改良を通じて、臨床の腫瘍治療において良好な効果を得ている。つまり、ＣＡＲ－Ｔ療法は、非常に将来性があり、正確、迅速、効率的で、且つ癌を治癒し得る新型の腫瘍免疫療法である。
【０００３】
しかし、ＣＡＲ－Ｔ療法には依然として多くの限界がある。例えば、腫瘍の臨床治療で遭遇するサイトカインストームや、神経毒性の安全性、持続的増殖能力に劣るといった問題がある。２０１５年、「ランセット」に１つの第Ｉ相臨床試験（臨床試験番号：ＮＣＴ０１５９３６９６，２０１５．Ｌａｃｅｔ．ＴｃｅｌｌｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＣＤ１９ｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓｆｏｒａｃｕｔｅｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｌｅｕｋａｅｍｉａｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎａｎｄｙｏｕｎｇａｄｕｌｔｓ－ａｐｈａｓｅ１ｄｏｓｅ－ｅｓｃａｌａｔｉｏｎｔｒｉａｌ）が発表された。この発表によると、再発性又は難治性急性リンパ性白血病、或いは非ホジキンリンパ腫に罹患した患者（年齢１～３０歳）にＫＴＥ－Ｃ１９（ａｎｔｉ－ＣＤ１９２８Ｚ）ＣＡＲ－Ｔ療法を施してから、体内における血中ＣＡＲ－Ｔ細胞の数を検出したところ、１４日目にＣＡＲ－Ｔ細胞の数がピークに達したが、その後は、２８日目、４２日目に顕著な逓減が見られ、６８日目には全ての患者の血液からＣＡＲ－Ｔ細胞を検出できなくなったという。更に、２０１８年にも、「ニューイングランド・ジャーナル・オブ・メディシン」に１つの第Ｉ相臨床試験（臨床試験番号：ＮＣＴ０１０４４０６９，２０１８．ＮＥＪ．Ｌｏｎｇ－ＴｅｒｍＦｏｌｌｏｗ－ｕｐｏｆＣＤ１９ＣＡＲＴｈｅｒａｐｙｉｎＡｃｕｔｅＬｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃＬｅｕｋｅｍｉａ）の結果が発表された。この発表でも、再発性急性リンパ性白血病に罹患した５３名の患者にａｎｔｉ－ＣＤ１９２８ＺＣＡＲ－Ｔ療法を施してから、体内における血中ＣＡＲ－Ｔ細胞の数を検出したところ、中央値が１４日目に現れることが示された。これら２つの研究は、いずれも、２８ＺＣＡＲ－Ｔ細胞は持続的増殖・生存能力に比較的劣り、治療効果の向上が望まれることを示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ＣＡＲ構造自体の改変を設計するにあたっては、抗腫瘍効果を向上させ、疾病の寛解期を延ばし、再発率を低下させ、患者の生存期間を延ばすために、ＣＡＲ－Ｔ細胞の持続的生存能力を向上させるとの観点から考慮すればよい。上述した従来技術の欠点に鑑みて、本発明の目的は、Ｙ／Ｆ突然変異を有するＣＤ３ε細胞内領域を含むか、ＣＤ３ε細胞内塩基性アミノ酸リッチな領域のモチーフを含むキメラ抗原受容体及びその用途を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記の目的及び関連するその他の目的を実現するために、本発明は、第１の態様におい
て、Ｙ／Ｆ突然変異を有するＣＤ３ε細胞内領域を含むキメラ抗原受容体を提供する。当該キメラ抗原受容体は、順に連結される細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内ドメインを含む。前記細胞外ドメインは抗原認識領域とヒンジ領域を含む。
【０００６】
前記細胞内ドメインにおける膜貫通ドメインに連結される一端には、Ｙ／Ｆ突然変異を有するＣＤ３ε細胞内領域が連結されている。前記Ｙ／Ｆ突然変異を有するＣＤ３ε細胞内領域とは、ＣＤ３ε細胞内領域の免疫受容体活性化チロシンモチーフ（Ｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅ－ｂａｓｅｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｍｏｔｉｆ，ＩＴＡＭ）における２つのチロシンがいずれもフェニルアラニンに突然変異したＹ／Ｆ突然変異型ＣＤ３ε細胞内領域のことである。
【０００７】
本発明は、第２の態様において、ポリヌクレオチド配列を提供する。当該ポリヌクレオチド配列は、（１）本発明の第１の態様で述べたＹ／Ｆ突然変異を有するＣＤ３ε細胞内領域を含むキメラ抗原受容体をコードするポリヌクレオチド配列と、（２）（１）で述べたポリヌクレオチド配列の相補的配列、から選択される。
【０００８】
本発明は、第３の態様において、核酸構築物を提供する。前記核酸構築物は、本発明の第２の態様で述べたポリヌクレオチド配列を含む。
【０００９】
好ましくは、前記核酸構築物はベクターである。
【００１０】
より好ましくは、前記核酸構築物はレンチウイルスベクターであって、複製起点、３’ＬＴＲ、５’ＬＴＲ、及び本発明の第２の態様で述べたポリヌクレオチド配列を含む。
（【００１１】以降は省略されています）

関連特許