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公開番号2025108479
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-07-23
出願番号2025061343,2021573489
出願日2025-04-02,2020-06-12
発明の名称ラムノース-多糖
出願人ユニバーシティオブダンディー
代理人個人,個人,個人
主分類C12P 19/04 20060101AFI20250715BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】多糖の均質、純粋かつ高い収率の結果を生じるGAS多糖類の製造方法を提供する。
【解決手段】本発明は、ラムノース多糖の合成方法に関する。本発明はまた、合成連鎖球菌性多糖、連鎖球菌性複合糖質、前記連鎖球菌性多糖もしくは複合糖質を含む免疫原性組成物またはワクチンならびに動物における免疫応答を上昇させるために使用される、または、連鎖球菌性病因を伴う疾患、状態または感染を治療もしくは予防するために使用される、前記多糖、複合糖質、免疫原性組成物またはワクチンにも関する。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
ラムノース多糖の合成方法であって、以下
（ｉ）ヘキソース－β－１，４－ラムノシルトランスフェラーゼ、ヘキソース－α－１，
２－ラムノシルトランスフェラーゼおよび／またはヘキソース－α－１，３－ラムノシル
トランスフェラーゼ、またはそれらの酵素的に活性なフラグメントもしくはバリアントを
使用してラムノース部分をヘキソース単糖、二糖または三糖へ転移させて、二糖、三糖ま
たは四糖であって、ラムノース部分を前記二糖、三糖または四糖の非還元末端に含む、二
糖、三糖または四糖を形成すること；
（ｉｉ）異種細菌酵素ＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｅｓグループＡ炭水化
物酵素Ｃ（ＧａｃＣ）および／またはＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｅｓグ
ループＡ炭水化物酵素Ｇ（ＧａｃＧ）またはそれらの酵素的に活性なホモログ、バリアン
トもしくはフラグメントを使用して前記二糖、三糖または四糖の前記非還元末端にて前記
ラムノース部分から延長することによって前記ラムノース多糖を生成すること
を含む、方法。
続きを表示（約 1,000 文字）【請求項２】
前記方法は、前記酵素ＧａｃＣおよび／またはＧａｃＧ、またはそれらの酵素的に活性
なホモログ、バリアントもしくはフラグメントが由来する前記細菌種と異種の細菌種中で
実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ヘキソース－β－１，４－ラムノシルトランスフェラーゼは、ＧｌｃＮＡｃ－β－
１，４－ラムノシルトランスフェラーゼではない、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ヘキソース－β－１，４－ラムノシルトランスフェラーゼは、Ｇｌｃ－β－１，４
－ラムノシルトランスフェラーゼまたはその酵素的に活性なフラグメントもしくはバリア
ントである、前出請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｇｌｃ－β－１，４－ラムノシルトランスフェラーゼは、ＷｃｈＦ酵素、またはそ
の酵素的に活性なフラグメントもしくはバリアントを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＷｃｈＦ酵素は、配列番号３６、またはその酵素的に活性なフラグメントもしくは
バリアントを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ヘキソース－α １，２－ラムノシルトランスフェラーゼは、ガラクトース－α－
１，２－ラムノシルトランスフェラーゼまたはその酵素的に活性なフラグメントもしくは
バリアントである、前出請求項のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ガラクトース－α－１，２－ラムノシルトランスフェラーゼは、ＷｂｂＲ酵素、ま
たはその酵素的に活性なフラグメントもしくはバリアントを含む、請求項７に記載の方法
。
【請求項９】
前記ＷｂｂＲ酵素は、配列番号３７、またはその酵素的に活性なフラグメントもしくは
バリアントを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ヘキソース－α－１，３－ラムノシルトランスフェラーゼは、ＧｌｃＮＡｃ－α－
１，３－ラムノシルトランスフェラーゼ、ｄｉＮＡｃＢａｃ－α－１，３－ラムノシルト
ランスフェラーゼ、Ｇｌｃ－α－１，３－ラムノシルトランスフェラーゼ、ガラクトース
－α－１，３－ラムノシルトランスフェラーゼまたはそれらの酵素的に活性なフラグメン
トもしくはバリアントである、前出請求項のいずれか一項に記載の方法。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
（分野）
本発明は、ラムノース多糖の合成方法に関する。本発明はまた、合成連鎖球菌性多糖、
連鎖球菌性複合糖質、前記連鎖球菌性多糖もしくは複合糖質を含む免疫原性組成物または
ワクチンならびに動物における免疫応答を上昇させるために使用される、または、連鎖球
菌性病因を伴う疾患、状態または感染を治療もしくは予防するために使用される、前記多
糖、複合糖質、免疫原性組成物またはワクチンにも関する。
続きを表示（約 2,100 文字）【背景技術】
【０００２】
（背景）
細菌のＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ属は、幅広い宿主に感染し、注目すべき数の疾患の原
因となる一群の汎用性のあるグラム陽性菌である。
【０００３】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｅｓ（グループＡＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ、ＧＡＳ）は、種々の疾患を引き起こす、ヒト限定のグラム陽性菌である。おそら
くこの微生物の流行力の評価が過小評価されていることは、世界中で年間７億人以上が苦
しんでおり、他の疾患の中でも膿痂疹、咽頭炎、猩紅熱、壊死性筋膜炎、髄膜炎およびト
キシックショック症候群などの種々の疾患を引き起こしていることを示唆している。さら
に、急性リウマチ熱、急性糸球体腎炎またはリウマチ性心疾患などの自己免疫性感染後遺
症は以前にＧＡＳ感染症に罹患した個々に影響を及ぼし得、この病原体によって引き起こ
される臨床症状のリストを拡大する。グループＡ炭水化物（ＧＡＣ）は、Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇｅｎｅｓ由来のペプチドグリカンアンカードラムノース－多糖（
ＲｈａＰＳ）であり、細菌の生存に必須であり、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｙｏｇ
ｅｎｅｓのヒト宿主への感染能に寄与する。
【０００４】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅ（グループＢＳｔｒｅｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ、ＧＢＳ）は、（病原性）共生細菌であり、全成人ヒトの２０～４０％が保有
している。女性の２５％は、腟にＧＢＳを保有しており、通常は無症状で存在する。しか
しながら、妊婦では、ＧＢＳは早産、母体感染症、死産および後期流産の原因として認識
されている。現在の予防方策にもかかわらず、英国で生まれた乳児１０００人に１人がＧ
ＢＳ感染症を発症する。早産児は、免疫系が十分に発達していないため、ＧＢＳ感染の危
険が特に高いことが知られている。この結果、英国ではＧＢＳ感染により１週間に１人の
乳児が死亡し、１人の乳児が長期的な障害を抱えながら生存することになる。
【０００５】
グループＣＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ（ＧＣＳ）は、ヒトにおいてガス疾患と臨床
的に区別できない流行性咽頭炎および蜂巣炎を引き起こし得る。また、糖尿病、癌などの
素因となる状態の患者または高齢患者において、敗血症、心内膜炎、敗血症性関節炎およ
び壊死性感染症を引き起こすことが知られている。馬の動物では、ＧＣＳが腺疫として知
られる伝染性が高く重篤な上気道感染の原因となっており、世界的な分布で地方病となっ
ている。
【０００６】
グループＧＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ（ＧＧＳ）は、例えばヒト皮膚のような皮膚
感染症を引き起こす重大なヒト病原体である。ＧＧＳは口腔咽頭、消化管および女性生殖
器にも感染する。ＧＧＳに関連するその他の感染症としては、敗血症、心内膜炎、髄膜炎
、腹膜炎、肺臓炎、膿胸、敗血症性関節炎等の生命を脅かす可能性のあるいくつかの感染
症が挙げられる。
【０００７】
ＧＡＳ感染を効果的に制御、治療、および予防するための抗菌薬の選択肢は、より限定
されるようになってきている。これは、新興の抗生物質耐性、パンデミック現像、そして
高病原性株の蔓延によるものである。したがって、安全で効果的なワクチン候補の開発が
明らかに必要である。１２０を超える異なるＧＡＳ血清型の大部分を標的とすることがで
きるワクチンのためには、遍在性の、保存された、そして必須のＧＡＳ標的に基づく必要
がある。そのような標的の１つがＧＡＣであり、これは病原体にとって必須の構造的成分
であるだけでなく、毒性決定因子でもある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ワクチン開発の現在の形態はネイティブ細菌からの化学的および酵素的抽出方法、なら
びに任意のアクセプター化合物（例えば、タンパク質またはペプチド）への化学的結合に
限定される。これは、労働集約的であり、産物の収率及び品質を制限する結果となる。労
働集約的でなく、多糖の均質、純粋かつ高い収率の結果を生じるＧＡＳ多糖類の製造方法
が明らかに必要とされている。本発明は、これらの問題を念頭に置いて考案されたもので
ある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（説明）
その最も広い意味において、本開示は、多糖、特にラムノース多糖の合成方法に関する
。
【００１０】
（詳細な説明）
本発明は、以下の図面を参照して、例として説明される：
【図面の簡単な説明】
（【００１１】以降は省略されています）

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