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公開番号2025144562
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-10-02
出願番号2025045939
出願日2025-03-19
発明の名称変異型ATF2タンパク質およびその用途
出願人和歌山県
代理人弁理士法人レクシード・テック
主分類C12N 9/10 20060101AFI20250925BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】酢酸イソアミルの産生能が改善されたATF2タンパク質を提供する。
【解決手段】本開示の変異型ATF2タンパク質は、酵母の野生型ATF2タンパク質のアミノ酸配列において、少なくとも1以上の変異を含み、
前記野生型ATF2タンパク質と比較して、酢酸イソアミルの産生能が向上している。
【選択図】図3

特許請求の範囲【請求項１】
酵母の野生型ＡＴＦ２タンパク質のアミノ酸配列において、少なくとも１以上の変異を含み、
前記野生型ＡＴＦ２タンパク質と比較して、酢酸イソアミルの産生能が向上している、変異型ＡＴＦ２タンパク質。
続きを表示（約 1,800 文字）【請求項２】
前記変異型ＡＴＦ２タンパク質は、下記（Ａｍ）のアミノ酸配列からなり、前記野生型ＡＴＦ２タンパク質と比較して、酢酸イソアミルの産生能が向上しているタンパク質である、請求項１に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質：
（Ａｍ）下記（Ａｍ１）、（Ａｍ２）、または（Ａｍ３）のアミノ酸配列：
（Ａｍ１）野生型ＡＴＦ２タンパク質（Ａｗタンパク質）のアミノ酸配列において、基準ＡＴＦ２タンパク質（Ａｓタンパク質、配列番号１）における、２７位、１４７位、１８７位、２２２位、２５０位、２６９位、２９０位、２９４位、３０１位、３０７位、３４０位、３５２位、３９８位、４０１位、４１０位、４１１位、４６８位、４７９位、４８１位、４８２位、４８３位、４８４位、および５１４位のアミノ酸残基からなる群から選択された少なくとも１つのアミノ酸残基と対応するアミノ酸残基に変異を有するアミノ酸配列；
（Ａｍ２）（Ａｍ１）のアミノ酸配列において、１～５３個の挿入、付加、置換および／または欠失を有し、かつ、（Ａｍ１）の変異されたアミノ酸残基が維持されているアミノ酸配列；
（Ａｍ３）（Ａｍ１）のアミノ酸配列に対して、９０％以上の同一性を有し、かつ、（Ａｍ１）の変異されたアミノ酸残基が維持されているアミノ酸配列。
【請求項３】
前記（Ａｍ１）のアミノ酸配列は、前記Ａｗタンパク質において、前記Ａｓタンパク質における、１４７位、２９０位、２９４位、３５２位、４７９位、４８１位、４８２位、４８４位、または５１４位のアミノ酸残基と対応するアミノ酸残基に変異を有する、請求項２に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質。
【請求項４】
前記（Ａｍ１）のアミノ酸配列は、前記Ａｗタンパク質において、前記Ａｓタンパク質における、Ｌ２７、Ｅ１４７、Ｔ１８７、Ｆ２２２、Ｄ２５０、Ｅ２６９、Ｎ２９０、Ｓ２９４、Ｆ３０１、Ｅ３０７、Ｋ３４０、Ｄ３５２、Ｎ３９８、Ｆ４０１、Ｄ４１０、Ｒ４１１、Ｔ４６８、Ｓ４７９、Ｓ４８１、Ａ４８２、Ｇ４８３、Ａ４８４、およびＤ５１４からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸残基と対応するアミノ酸残基に変異を有する、請求項２に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質。
【請求項５】
前記（Ａｍ１）のアミノ酸配列は、前記Ａｗタンパク質において、前記Ａｓタンパク質における、Ｅ１４７、Ｎ２９０、Ｓ２９４、Ｄ３５２、Ｓ４７９、Ｓ４８１、Ａ４８２、Ａ４８４、またはＤ５１４のアミノ酸残基と対応するアミノ酸残基に変異を有する、請求項２に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質。
【請求項６】
前記（Ａｍ１）のアミノ酸配列は、前記Ａｗタンパク質において、前記Ａｓタンパク質における、Ｌ２７Ｓ、Ｅ１４７Ｄ、Ｔ１８７Ａ、Ｆ２２２Ｙ、Ｄ２５０Ｖ、Ｅ２６９Ｄ、Ｎ２９０Ｋ、Ｓ２９４Ｒ、Ｅ３０７Ｋ、Ｋ３４０Ｒ、Ｄ３５２Ｎ、Ｎ３９８Ｓ、Ｆ４０１Ｌ、Ｄ４１０Ｖ、Ｒ４１１Ｓ、Ｔ４６８Ａ、Ｓ４７９Ａ、Ｓ４８１Ｌ、Ｓ４８１Ｒ、Ｓ４８１Ｈ、Ｓ４８１Ｗ、Ｓ４８１Ｍ、Ａ４８２Ｃ、Ａ４８２Ｐ、Ａ４８２Ｖ、Ｇ４８３Ｈ、Ａ４８４Ｇ、およびＤ５１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸残基と対応するアミノ酸残基の変異を有する、請求項２に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質。
【請求項７】
前記（Ａｍ１）のアミノ酸配列は、前記Ａｗタンパク質において、前記Ａｓタンパク質における、Ｅ１４７Ｄ、Ｎ２９０Ｋ、Ｓ２９４Ｒ、Ｄ３５２Ｎ、Ｓ４７９Ａ、Ｓ４８１Ｌ、Ｓ４８１Ｒ、Ｓ４８１Ｈ、Ｓ４８１Ｗ、Ｓ４８１Ｍ、Ａ４８２Ｃ、Ａ４８２Ｐ、Ａ４８２Ｖ、Ａ４８４Ｇ、またはＤ５１４Ｇのアミノ酸残基と対応するアミノ酸残基に変異を有する、請求項２に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質。
【請求項８】
請求項１から７のいずれか一項に記載の変異型ＡＴＦ２タンパク質をコードする、変異型ＡＴＦ２遺伝子。
【請求項９】
請求項８に記載の変異型ＡＴＦ２遺伝子を含む、酵母。
【請求項１０】
請求項９に記載の酵母を用いて、アルコール含有組成物を製造する製造工程を含む、アルコール含有組成物の製造方法。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本開示は、変異型ＡＴＦ２タンパク質およびその用途に関する。
続きを表示（約 1,100 文字）【背景技術】
【０００２】
清酒醸造において、酵母（Saccharomyces cerevisiae）は、アルコールだけでなく、吟醸香を形成する多くの香気成分を産生する。前記香気成分の産生量のバランスは、酵母の菌株によって異なる。このため、製品設計において、前記酵母の選択は、重要な因子である。
【０００３】
清酒の吟醸香の成分としては、リンゴ様の香気成分として、カプロン酸エチルが知られている。また、前記吟醸香の別の成分として、バナナ様の香気を持つ酢酸イソアミルが知られている。このため、これらの吟醸香成分を高産生する酵母株の開発が行われている（特許文献１～３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
特開昭６３－３０９１７５号公報
特開昭６２－００６６６９号公報
特開２００２－１９１３５５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
前記清酒が含有する酢酸イソアミルの産生には、ＡＴＦ２遺伝子が関与していることが知られている。そこで、酵母株に対して、ＡＴＦ２遺伝子を過剰発現させることにより酢酸イソアミルの産生能が改善された酵母株が作製されている。しかしながら、本発明者らは、ＡＴＦ２遺伝子を過剰発現させても、その発現量に上限があり、酵母株の酢酸イソアミルの産生能の向上に限界があるとの課題を見出した。
【０００６】
そこで、本開示は、酢酸イソアミルの産生能が改善したＡＴＦ２タンパク質、前記ＡＴＦ２タンパク質をコードする遺伝子、前記遺伝子を含む酵母、前記酵母を用いたアルコール含有組成物の製造方法、抽出物、食品組成物および化粧品組成物、ならびに前記酵母の製造方法の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
前記目的を達成するため、本開示の変異型ＡＴＦ２タンパク質は、酵母の野生型ＡＴＦ２タンパク質のアミノ酸配列において、少なくとも１以上の変異を含み、
前記野生型ＡＴＦ２タンパク質と比較して、酢酸イソアミルの産生能が向上している。
【０００８】
本開示の変異型ＡＴＦ２遺伝子は、本開示の変異型ＡＴＦ２タンパク質をコードする。
【０００９】
本開示の酵母は、本開示の変異型ＡＴＦ２遺伝子を含む。
【００１０】
本開示のアルコール含有組成物の製造方法は、本開示の酵母を用いて、アルコール含有組成物を醸造する工程を含む。
（【００１１】以降は省略されています）

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