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公開番号2025118995
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-08-13
出願番号2025085330,2023559175
出願日2025-05-22,2020-12-09
発明の名称抗OX40L抗体、抗OX40L及び抗TNFαの二重特異性抗体、並びにこれらの用途
出願人エイチケーイノ.エヌコーポレーション,ワイ-バイオロジクス・インコーポレイテッド,アイエムバイオロジクスコーポレーション
代理人弁理士法人秀和特許事務所
主分類C07K 16/28 20060101AFI20250805BHJP(有機化学)
要約【課題】本発明は、OX40Lに特異的に結合する新規な抗体、及びOX40LとTNFαに特異的に結合する二重特異性抗体を提供することを課題とする。
【解決手段】ヒトOX40Lに特異的に結合し、OX40とOX40受容体との結合を効果的に阻害する抗体又は二重特異性抗体、前記抗体をコードする核酸、前記核酸を含む発現ベクター、前記発現ベクターを含む形質転換体、前記抗体の作製方法、前記抗体を含む自己免疫疾患又は炎症性疾患の治療用薬学的組成物、前記抗体を含む自己免疫疾患又は炎症性疾患の診断用組成物、前記抗体を用いた自己免疫疾患又は炎症性疾患の診断方法、及び前記抗体を用いて自己免疫疾患又は炎症性疾患を診断するための情報の提供方法及びこれを提供するキットを見出した。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
ＯＸ４０Ｌ（ＯＸ４０リガンド）に特異的に結合し、ＯＸ４０ＬとＯＸ４０受容体との相互作用を阻害する、抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
続きを表示（約 2,200 文字）【請求項２】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は、配列番号３及び４からなる群から選択されるアミノ酸配列に記載の１つ以上のエピトープに結合するものである、請求項１に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項３】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は、ヒトＯＸ４０Ｌに１×１０
－９
Ｍ以下のＫ
Ｄ
で結合し、ここで、前記Ｋ
Ｄ
は、表面プラズモン共鳴（ｓｕｒｆａｃｅｐｌａｓｍｏｎｒｅｓｏｎａｎｃｅ；Ｂｉａｃｏｒｅ）分析によって測定されたものである、請求項１又は２に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項４】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は：
配列番号１２、１３及び１４からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の重鎖ＣＤＲ１；配列番号：１５、１６、１７及び１８からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の重鎖ＣＤＲ２；及び配列番号：１９、２０、２１及び２２からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の重鎖ＣＤＲ３；を含む重鎖可変領域、及び
配列番号２３及び２４からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の軽鎖ＣＤＲ１；配列番号２５及び２６からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の軽鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２７、２８、２９及び３０からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の軽鎖ＣＤＲ３；を含む軽鎖可変領域を含むものである、請求項１又は２に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項５】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は：
（ｉ）配列番号１２に記載の重鎖ＣＤＲ１；配列番号１５に記載の重鎖ＣＤＲ２及び配列番号１９に記載の重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び配列番号２３に記載の重鎖ＣＤＲ１；配列番号２５に記載の重鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２７に記載の軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
（ｉｉ）配列番号１３に記載の重鎖ＣＤＲ１；配列番号１６に記載の重鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２０に記載の重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び配列番号２４に記載の軽鎖ＣＤＲ１；配列番号２６に記載の軽鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２８に記載の軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片；
（ｉｉｉ）配列番号１３に記載の重鎖ＣＤＲ１；配列番号１７に記載の重鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２１に記載の重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び配列番号２４に記載の軽鎖ＣＤＲ１；配列番号２６に記載の軽鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２９に記載の軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片；又は
（ｉｖ）配列番号１４に記載の重鎖ＣＤＲ１；配列番号１８に記載の重鎖ＣＤＲ２；及び配列番号２２に記載の重鎖ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び配列番号２４に記載の軽鎖ＣＤＲ１；配列番号２６に記載の軽鎖ＣＤＲ２；及び配列番号３０に記載の軽鎖ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗体又はその抗原結合断片である、請求項１又は２に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項６】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は：
配列番号３７、４１、４５、４９及び５３からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の重鎖可変領域；及び
配列番号３８、４２、４６、５０及び５４からなる群から選択される１つのアミノ酸配列に記載の軽鎖可変領域を含むものである、請求項１又は２に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項７】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は：
（ａ）配列番号３７に記載の重鎖可変領域及び配列番号３８に記載の軽鎖可変領域；
（ｂ）配列番号４１に記載の重鎖可変領域及び配列番号４２に記載の軽鎖可変領域；
（ｃ）配列番号４５に記載の重鎖可変領域及び配列番号４６に記載の軽鎖可変領域；
（ｄ）配列番号４９に記載の重鎖可変領域及び配列番号５０に記載の軽鎖可変領域；又は
（ｅ）配列番号５３に記載の重鎖可変領域及び配列番号５４に記載の軽鎖可変領域；
を含むものである、請求項１又は２に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項８】
前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片は：
配列番号５、６、７及び８からなる群から選択される一つのアミノ酸配列に記載の重鎖定常領域；及び
配列番号１０のアミノ酸配列に記載の軽鎖定常領域を含むものである、請求項７に記載の抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片。
【請求項９】
ＯＸ４０Ｌに特異的に結合する抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片；及びＴＮＦαに特異的に結合する抗ＴＮＦα抗体又はその抗原結合断片を含む、二重特異性（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ）抗体。
【請求項１０】
前記二重特異性抗体は、抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片と抗ＴＮＦα抗体又はその抗原結合断片とが連結されているものである、請求項９に記載の二重特異性抗体。
（【請求項１１】以降は省略されています）
発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＯＸ４０Ｌに特異的に結合する新規な抗体、及びＯＸ４０ＬとＴＮＦαに特異的に結合する二重特異性抗体に関するものであって、具体的には、ヒトＯＸ４０Ｌに特異的に結合し、ＯＸ４０とＯＸ４０受容体との結合を効果的に阻害する抗体又は二重特異性抗体、前記抗体をコードする核酸、前記核酸を含む発現ベクター、前記発現ベクターを含む形質転換体、前記抗体の作製方法、前記抗体を含む自己免疫疾患又は炎症性疾患の予防又は治療用薬学的組成物、前記抗体を含む自己免疫疾患又は炎症性疾患の診断用組成物、前記抗体を用いた自己免疫疾患又は炎症性疾患の診断方法、前記抗体を用いて自己免疫疾患又は炎症性疾患を診断するための情報の提供方法及びそのためのキットに関する。
続きを表示（約 2,700 文字）【背景技術】
【０００２】
自己免疫疾患又は炎症性疾患は、ヒトの免疫が異常に活性化することで起こる。自己免疫疾患の代表的なものである関節リウマチは、その治療薬としてＴＮＦα阻害剤が治療薬市場の６８％を占めている。
【０００３】
腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）は、単球及びマクロファージを含む多様な細胞によって産生されるサイトカインであり、これは、本来特定のマウス腫瘍の壊死を誘導する能力により同定された［参照文献：Ｏｌｄ，Ｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ２３０：６３０－６３２］。その後、悪液質に関連するカケクチン（ｃａｃｈｅｃｔｉｎ）と名付けられた因子がＴＮＦαと同一の分子であることが明らかになった。ＴＮＦαは、ショックの媒介に関与する［参照文献：Ｂｅｕｔｌｅｒ，Ｂ．ａｎｄＣｅｒａｍｉ，Ａ．（１９８８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５７：５０５－５１８；Ｂｅｕｔｌｅｒ，Ｂ．ａｎｄ
Ｃｅｒａｍｉ，Ａ．（１９８９）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：６２５－６５５］。さらに、ＴＮＦαは、敗血症、感染症、自己免疫疾患、移植拒絶反応、及び移植片対宿主病を含む様々なヒト疾患及び障害の病理生理学に関連している［参照文献：Ｖａｓｉｌｉ，Ｐ．（１９９２）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４１１－４５２；Ｔｒａｃｅｙ，Ｋ．Ｊ．ａｎｄＣｅｒａｍｉ，Ａ．（１９９４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．４５：４９１－５０３］。
【０００４】
様々な疾患におけるヒトＴＮＦα（ｈＴＮＦα）の有害な役割のために、治療戦略は、ｈＴＮＦα活性を阻害又は相殺するように計画されている。特に、ｈＴＮＦαに結合してそれを中和する抗体は、ｈＴＮＦα活性を阻害する手段として用いられた。ｈＴＮＦα中和抗体には、ｈＴＮＦαで免疫したマウスのリンパ球から得られたハイブリドーマによって分泌されたマウスモノクローナル抗体（ｍＡｂ）［参照文献：ＨａｈｎＴ；ｅｔａ
ｌ．，（１９８５）ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ８２：３８１４－３８１８；Ｌｉａｎｇ，Ｃ－Ｍ．，ｅｔａｌ．（１９８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１３７：８４７－８５４；Ｈｉｒａｉ，Ｍ．，ｅｔａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ９６：５７－６２；Ｆｅｎｄｌｙ，Ｂ．Ｍ．，ｅｔａｌ．（１９８７）Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ６：３５９－３７０；Ｍｕｌｌｅｒ，Ａ．，ｅｔａｌＬ．（１９９０）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ２：１６２－１６９；米国特許第５，２３１，０２４号（Ｍｏｅｌｌｅｒｅｔａｌ）；欧州特許公報第１８６８３３Ｂ１号（Ｗａｌｌａｃｈ，Ｄ．）；欧州特許出願第２１８８６８Ａｌ号（Ｏｌｄｅｔａｌ．）；欧州特許公報第２６０６１０Ｂ１号（Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ａ．，ｅｔ．）］又はキメラ抗体［参照文献：Ｋｎｉｇｈｔ，Ｄ．Ｍ，ｅｔａｌ．（１９９３）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３０：１４４３－１４５３；ＰＣＴ公開公報ＷＯ９２／１６５５３（Ｄａｄｄｏｎａ，Ｐ．Ｅ．，ｅｔａｌ．）］又はヒト化モノクローナル抗体［参考文献
：ＰＣＴ公開公報ＷＯ９２／１１３８３（Ａｄａｉｒ，Ｊ．Ｒ．，ｅｔａｌ．）］又はヒトモノクローナル抗体［参考文献：米国１０－１１４２８２５］などがある。これらの抗ｈＴＮＦα抗体は、ｈＴＮＦαに対して高親和性（例：Ｋｄ≦１０
－９
Ｍ）を示し、ｈＴＮＦα活性を中和することができる。このような抗ｈＴＮＦα抗体は、様々な自己免疫疾患、感染症、移植拒絶反応、及び移植片対宿主病などにおいて治療薬として用いられている。
【０００５】
しかしながら、これら抗ｈＴＮＦα抗体のＴＮＦα阻害剤に対して不応の患者群が約５０％に達している（ＮａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗｓＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙｖｏｌ．１１，２７６－２８９（２０１５）。しかも、近年開発されている自己免疫疾患の標的は、ＣＴＬＡ－４、ＩＬ－６、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、及びＣＤ２０などであり、これより派生した医薬品は、ＴＮＦα阻害剤ほどの効能を発揮できていない（ＮａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗｓＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙｖｏｌ．１１，２７６－２８９（２０１５））。
【０００６】
特に、関節リウマチなどの自己免疫疾患は、単に一種類の免疫細胞の異常ではなく、免疫系全般の問題によって起こるため、一つの標的のみを阻害する従来の治療薬開発方法では治療薬の有効性を向上させるのに限界がある。したがって、この有効性の限界を克服するために、異なる作用機序を有する２つ以上の標的を一度に制御する二重又は多重特異性抗体が開発されている。しかし、従来の二重特異性抗体は、先天性（ｉｎｎａｔｅ）免疫系又は後天性（ａｄａｐｔｉｖｅ）免疫系のうち特定の細胞にのみ限定して作用するため、免疫系全般の恒常性を改善することはできない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、ＯＸ４０Ｌ（ＯＸ４０リガンド）に特異的に結合する抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片を提供することである。
【０００８】
本発明の目的は、配列番号１（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）で示されるＯＸ４０Ｌタンパク質のアミノ酸配列において、配列番号３（ＳＥＱＩＤＮＯ：３）で示される９３番～１００番、及び配列番号４（ＳＥＱＩＤＮＯ：４）で示される１４１番～１５１番のアミノ酸配列を含むＯＸ４０Ｌの立体構造的エピトープ（ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｅｐｉｔｏｐｅ）を認識する、ＯＸ４０Ｌに特異的に結合する抗ＯＸ４０Ｌ抗体を提供することである。
【０００９】
本発明の目的は、ＯＸ４０Ｌ（ＯＸ４０リガンド）に特異的に結合する抗ＯＸ４０Ｌ抗体又はその抗原結合断片；及び腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）に特異的に結合する抗体又はその抗原結合断片；を含む、二重特異性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ）を提供することである。
【００１０】
本発明の目的は、前記抗ＯＸ４０Ｌ抗体、その結合断片又は前記二重特異性抗体をコードする核酸、前記核酸が導入された発現ベクター又は前記発現ベクターが導入された宿主細胞を提供することである。
（【００１１】以降は省略されています）

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