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公開番号2025141152
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-09-29
出願番号2024040946
出願日2024-03-15
発明の名称細胞剥離方法、および細胞剥離装置
出願人キヤノン株式会社
代理人個人,個人,個人,個人,個人
主分類C12M 1/00 20060101AFI20250919BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】培養基材に培養した培養基材に対して、超音波による振動と、叩打を組み合わせて細胞を剥離する方法で、剥離時間を短くし、かつ剥離時間のバラツキを小さくできる細胞剥離方法を提供すること。
【解決手段】培養基材の培養面に接着した細胞を、前記培養面から剥離する細胞剥離方法であって、超音波発生手段が超音波を発生させることで、前記培養基材を振動させる超音波発生工程と、前記培養基材を叩打する叩打工程と、を有し、前記培養基材と前記超音波発生手段が所定の領域内に位置する状態で、前記超音波発生工程と前記叩打工程が行われる、細胞剥離方法。
【選択図】図1
特許請求の範囲【請求項１】
培養基材の培養面に接着した細胞を、前記培養面から剥離する細胞剥離方法であって、超音波発生手段が超音波を発生させることで、前記培養基材を振動させる超音波発生工程と、前記培養基材を叩打する叩打工程と、を有し、
前記培養基材と前記超音波発生手段が所定の領域内に位置する状態で、前記超音波発生工程と前記叩打工程が行われる、細胞剥離方法。
続きを表示（約 790 文字）【請求項２】
前記所定の領域に位置する状態は、前記培養基材を上面から見た投影図と、前記超音波発生手段を上面から見た投影図とが、少なくとも一部が重なる状態である、請求項１に記載の細胞剥離方法。
【請求項３】
前記所定の領域内に位置する状態は、前記培養基材を上面から見た投影図の面積Ｓｄと、
前記超音波発生手段を上面から見た投影図の面積Ｓｕとで、面積が小さい側の重心が、面積が大きい側の投影図内に含まれる状態である、請求項１に記載の細胞剥離方法。
【請求項４】
前記超音波発生工程と前記叩打工程は、少なくともある時刻において同時に行われる、請求項１に記載の細胞剥離方法。
【請求項５】
前記培養基材は位置規制部材によって位置が規制されている、請求項１に記載の細胞剥離方法。
【請求項６】
前記位置規制部材は前記培養基材との接触部に突起を有しており、前記培養基材と点接触するように構成されている、請求項１に記載の細胞剥離方法。
【請求項７】
培養基材の培養面に接着した細胞を、前記培養面から剥離する細胞剥離装置であって、超音波を発生させることで、前記培養基材に超音波帯域の振動を与える超音波発生手段と、前記培養基材を叩打する叩打手段と、を有し、前記培養基材と前記超音波発生手段とが所定の領域内に位置する状態で、超音波の発生と叩打が行われる、細胞剥離装置。
【請求項８】
前記細胞剥離装置は位置規制部材を有し、前記培養基材は前記位置規制部材によって位置が規制されている、請求項７に記載の細胞剥離装置。
【請求項９】
前記位置規制部材は前記培養基材との接触部に突起を有しており、前記培養基材と点接触するように構成されている、請求項８に記載の細胞剥離装置。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は細胞剥離方法、および細胞剥離装置に関する。
続きを表示（約 2,000 文字）【背景技術】
【０００２】
再生医療の分野においては、大量の細胞が必要であり、特に、生体組織の多くを占める接着性細胞を効率的かつ安定的に供給することが求められている。接着性細胞の培養においては、例えばポリスチレンディッシュのような培養基材上での細胞の培養、基材からの細胞の剥離、細胞の回収及び洗浄の各工程を経て、目的とする細胞を取得する。細胞をさらに増やす際には、取得した細胞の一部をまた新たな基材に移して培養する、いわゆる継代操作を行なう。この一連の工程の中でも、細胞に対するダメージを与えずに、高い剥離率で回収するために、剥離方法の検討がされている。特許文献１には、細胞と、培地又は液体とを保持する基材に対して超音波帯域の振動を付与し、細胞の少なくとも一部を基材から剥離させる細胞剥離装置の開示がある。
【０００３】
特許文献２には、細胞を細胞培養容器から除去する方法として、掻把、叩打、および／または超音波を含む任意の好適な方法が挙げられている。しかし、特許文献２には、叩打と超音波を組み合わせて実行する場合の詳細について述べられていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
国際公開第２０１６－０４７３６８号明細書
特開２０２３－１１２１４７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、培養基材に培養した培養基材に対して、超音波による振動と、叩打を組み合わせて細胞を剥離する方法で、剥離時間を短くし、かつ剥離時間のバラツキを小さくできる細胞剥離方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明に係る細胞剥離方法は、培養基材の培養面に接着した細胞を、前記培養面から剥離する細胞剥離方法であって、超音波発生手段が超音波を発生させることで、前記培養基材を振動させる超音波発生工程と、前記培養基材を叩打する叩打工程と、を有し、前記培養基材と前記超音波発生手段が所定の領域内に位置する状態で、前記超音波発生工程と前記叩打工程が行われる。
【０００７】
本発明に係る細胞剥離装置は、培養基材の培養面に接着した細胞を、前記培養面から剥離する細胞剥離装置であって、緒音波を発生させることで、前記培養基材に超音波帯域の振動を与える超音波発生手段と、前記培養基材を叩打する叩打手段と、を有し、前記培養基材と前記超音波発生手段とが所定の領域内に位置する状態で、超音波の発生と叩打が行われる。
【発明の効果】
【０００８】
本発明に係る細胞剥離方法によれば、培養基材に培養した培養基材に対して、超音波による振動と、叩打を組み合わせて細胞を剥離する方法で、剥離時間を短くし、かつ剥離時間のバラツキを小さくできる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
本発明の実施形態に係る細胞剥離方法、細胞剥離装置の一例を示すフローチャート、および模式図
本発明の実施例１に係る細胞剥離方法を行う構成の概略断面図
本発明の実施例１の超音波発生手段１と培養基材３を上面から見た投影図
本発明の実施例１に係る細胞剥離方法の手順を示すフローチャート
本発明の実施例２に係る細胞剥離方法を行う構成の概略断面図
本発明の実施例２の超音波発生手段１と培養基材３を上面から見た投影図
本発明の実施例３に係る細胞剥離方法を行う構成の概略断面図
本発明の実施例３の超音波発生手段１と培養基材３を上面から見た投影図
本発明の実施例５に係る細胞剥離方法を行う構成の概略断面図
本発明の実施例５の超音波発生手段１と培養基材３を上面から見た投影図
本発明の実施例６に係る細胞剥離方法を行う構成の略断面図
本発明の実施例６の超音波発生手段１と培養基材３を上面から見た投影図
本発明の実施例７に係る細胞剥離方法を行う構成の一例を示す模式図
本発明の実施例８に係る細胞剥離方法を行う構成の一例を示す模式図
本発明の実施例９に係る細胞剥離方法を行う構成の一例を示す模式図
本発明の実施例９に係る細胞剥離方法の手順を示すフローチャート
比較例に係る細胞剥離方法を行う構成の一例を示す模式図
比較例の叩打工程における超音波発生手段１と培養基材３の位置関係
比較例の叩打工程における超音波発生手段１と培養基材３を上面から見た投影図
比較例に係る細胞剥離方法の手順を示すフローチャート
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明の実施形態に係る細胞剥離方法、及び細胞剥離装置について説明するが、本発明はこれに限られない。
（【００１１】以降は省略されています）

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