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公開番号2025138773
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-09-25
出願番号2025108133,2021571945
出願日2025-06-26,2020-06-04
発明の名称カッパ遺伝子座から発現される限られたラムダ軽鎖レパートリーを有する非ヒト動物及びその使用
出願人リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド,REGENERON PHARMACEUTICALS, INC.
代理人個人,個人
主分類A01K 67/0275 20240101AFI20250917BHJP(農業;林業;畜産;狩猟;捕獲;漁業)
要約【課題】カッパ遺伝子座から発現される限られたラムダ軽鎖レパートリーを有する非ヒト動物及びその使用の提供。
【解決手段】本開示は、とりわけ、遺伝子改変された非ヒト動物であって、その生殖細胞系列ゲノムは、非ヒトCλ遺伝子セグメントに機能可能に連結された単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域を含む修飾された内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座を含み、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域は、ヒトVλ遺伝子セグメント及びヒトJλ遺伝子セグメントを含む、遺伝子改変された非ヒト動物を提供する。遺伝子改変された非ヒト動物のB細胞によって発現されるすべての免疫グロブリンλ軽鎖は、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域またはその体細胞超変異バージョンから発現されるヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変ドメインを含む。
【選択図】図1A
特許請求の範囲【請求項１】
明細書に記載の発明。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年６月５日に出願された米国仮出願第６２／８５７，７１２号の利益を主張し、これは参照により本明細書に組み込まれる。
続きを表示（約 3,400 文字）【０００２】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。２０２０年５月２０日に作成されたＡＳＣＩＩコピーは、２０１０７９４－２０５０＿ＳＬ．ｔｘｔという名前であり、サイズが４７，５７６バイトである。
【背景技術】
【０００３】
ヒト抗体は、最も急速に成長している治療剤のクラスである。それらの生成のために現在使用されている技術のうち、ヒト抗体を全体としてまたは部分的にコードする遺伝物質で修飾された遺伝子修飾された動物（例えば、げっ歯類）の開発は、様々な疾患の処置のためのヒト治療モノクローナル抗体の分野に改革をもたらしてきた。依然として、宿主の遺伝子修飾された動物においてヒト抗体レパートリーを最大化するヒトモノクローナル抗体を生成するための改善されたｉｎｖｉｖｏシステムの開発が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本開示は、遺伝子改変されたげっ歯類を提供する。いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、ラットまたはマウスである。いくつかの実施形態では、すべての内因性配列は、ラットまたはマウス配列である。例えば、いくつかの実施形態では、遺伝子改変されたげっ歯類は、ラットであり、すべての内因性配列は、ラット配列である。いくつかの実施形態では、遺伝子改変されたげっ歯類は、マウスであり、すべての内因性配列は、マウス配列である。
【０００５】
いくつかの実施形態では、本開示は、第１の遺伝子改変されたげっ歯類、第２の遺伝子改変されたげっ歯類、及び第３の遺伝子改変されたげっ歯類を含む本明細書で提供される遺伝子改変されたげっ歯類の繁殖コロニーであって、第１、第２、及び第３の遺伝子改変されたげっ歯類はそれぞれ、本明細書に記載される遺伝子改変されたげっ歯類である、繁殖コロニーを提供する。いくつかの実施形態では、第３の遺伝子改変されたげっ歯類は、第１の遺伝子改変されたげっ歯類及び第２の遺伝子改変されたげっ歯類の子孫である。
【０００６】
提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む生殖細胞系列ゲノムを有する。いくつかの実施形態では、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーは、１つまたは２つの非再編成ヒトＶλ遺伝子セグメント及び１つ以上の非再編成ヒトＪλ遺伝子セグメントを含み得る。いくつかの実施形態では、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーは、２つの非再編成ヒトＶλ遺伝子セグメント及び４つの非再編成ヒトＪλ遺伝子セグメントを含み得る。いくつかの実施形態では、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーは、２つの非再編成ヒトＶλ遺伝子セグメント及び５つの非再編成ヒトＪλ遺伝子セグメントを含み得る。いくつかの実施形態では、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーは、ヒトＶλ遺伝子セグメント及びヒトＪλ遺伝子セグメントを含む単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域を含む、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域を含み得る。
【０００７】
いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類のＢ細胞によって発現されるすべての免疫グロブリンλ軽鎖は、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーから発現されるヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類のＢ細胞によって発現されるすべての免疫グロブリンλ軽鎖は、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域またはその体細胞超変異バージョンから発現されるヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される遺伝子改変されたげっ歯類のＢ細胞によって発現されるすべての免疫グロブリン軽鎖は、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域またはその体細胞超変異バージョンから発現されるヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、遺伝子改変されたげっ歯類のＢ細胞によって発現されるすべての重鎖は、ヒト免疫グロブリン重鎖可変ドメイン及びげっ歯類免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む。
【０００８】
いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む修飾された内因性げっ歯類免疫グロブリン軽鎖遺伝子座を含む。いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む修飾された内因性げっ歯類免疫グロブリンλ軽鎖遺伝子座を含む。いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む修飾された内因性げっ歯類免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座を含む。いくつかの実施形態では、遺伝子改変されたげっ歯類の生殖細胞系列ゲノムは、修飾された内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座（例えば、修飾された内因性免疫グロブリンλまたはκ軽鎖遺伝子座）についてホモ接合性である。いくつかの実施形態では、遺伝子改変されたげっ歯類の生殖細胞系列ゲノムは、修飾された内因性免疫グロブリン軽鎖遺伝子座（例えば、修飾された内因性免疫グロブリンλまたはκ軽鎖遺伝子座）についてヘテロ接合性である。
【０００９】
いくつかの実施形態では、遺伝子改変されたげっ歯類の生殖細胞系列ゲノムは、２つのアレルを含む修飾された内因性免疫グロブリンκ遺伝子座を含む。いくつかの実施形態では、第１のアレルは、限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含み、第２のアレルは、限られたヒトκ軽鎖可変領域レパートリーを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される遺伝子改変されたげっ歯類、ならびにそれによるげっ歯類細胞及びげっ歯類組織の生殖細胞系列ゲノムは、げっ歯類Ｃλ遺伝子セグメントに機能可能に連結された単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域を含む第１の修飾された内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座アレルを含み、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域は、ヒトＶλ遺伝子セグメント及びヒトＪλ遺伝子セグメントを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される遺伝子改変されたげっ歯類、ならびにそれによるげっ歯類細胞またはげっ歯類組織は、げっ歯類Ｃκ遺伝子セグメントに機能可能に連結された単一の再編成されたヒト免疫グロブリンκ軽鎖可変領域を含む第２の修飾された内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座アレルを含み、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンκ軽鎖可変領域は、ヒトＶκ遺伝子セグメント及びヒトＪκ遺伝子セグメントを含む。いくつかの実施形態では、そのような非ヒト動物または非ヒト組織は、第１の修飾された内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座アレルからλ軽鎖及び第２の修飾された内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座アレルからκ軽鎖を発現し得る。いくつかの実施形態では、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンκ軽鎖可変領域は、Ｖκ３－２０またはＶκ１－３９を含み、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域は、Ｖλ１－５１またはＶλ２－１４を含む。一実施形態では、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンκ軽鎖可変領域は、Ｖκ３－２０／Ｊκ１であり、単一の再編成されたヒト免疫グロブリンλ軽鎖可変領域は、Ｖλ１－５１／Ｊλ２またはＶλ２－１４／Ｊλ２である。
【００１０】
いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、軽鎖定常領域遺伝子セグメントに機能可能に連結された限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む。いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、Ｃκ遺伝子セグメントに機能可能に連結された限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む。いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変されたげっ歯類は、Ｃλ遺伝子セグメントに機能可能に連結された限られたヒトλ軽鎖可変領域レパートリーを含む。
（【００１１】以降は省略されています）

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