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公開番号2025115265
公報種別公開特許公報(A)
公開日2025-08-06
出願番号2024009728
出願日2024-01-25
発明の名称ポリヒドロキシアルカン酸の製造方法
出願人株式会社カネカ
代理人弁理士法人 HARAKENZO WORLD PATENT & TRADEMARK
主分類C12P 7/625 20220101AFI20250730BHJP(生化学;ビール;酒精;ぶどう酒;酢;微生物学;酵素学;突然変異または遺伝子工学)
要約【課題】PHAの水性懸濁液中での凝集の抑制と、水性懸濁液からのPHAの分離性とを両立させ得る、PHAの製造方法を提供する。
【解決手段】PHAを含有する菌体を含む培養液に、無機過酸化物を添加する工程、有機過酸化物を添加する工程、アルカリ性タンパク質分解酵素を添加する工程、および、pHを一定範囲に調整する工程により、PHAの水性懸濁液を得、さらに、当該水性懸濁液を遠心分離する工程を含む、PHAの製造方法。
【選択図】なし
特許請求の範囲【請求項１】
（ａ）ポリヒドロキシアルカン酸を含有する菌体を含む培養液に無機過酸化物を添加する工程、
（ｂ）前記工程（ａ）で得られた培養液に有機過酸化物を添加し、当該有機過酸化物の１分間半減期温度以下であって、かつ、０～１００℃の温度で維持する工程、
（ｃ）前記工程（ｂ）で得られた培養液にアルカリ性タンパク質分解酵素を添加して、酵素処理を行う工程、
（ｄ）前記工程（ｃ）で得られた培養液のｐＨを１０．０～１２．０に調整する工程、および、
（ｅ）前記工程（ｄ）で得られたポリヒドロキシアルカン酸の水性懸濁液を遠心分離する工程、
を含む、ポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
続きを表示（約 670 文字）【請求項２】
前記工程（ｂ）における、前記有機過酸化物の添加量は、前記工程（ａ）で得られた培養液に含まれるポリヒドロキシアルカン酸１００重量部に対して、０．１～５重量部である、請求項１に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
【請求項３】
前記有機過酸化物は、１分間半減期温度が１４０℃以下のパーオキシジカーボネートまたはパーオキシエステルである、請求項１または２に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
【請求項４】
前記工程（ａ）は、前記無機過酸化物を添加したポリヒドロキシアルカン酸を含有する菌体を含む培養液を、３０～７５℃で維持する工程を含む、請求項１または２に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
【請求項５】
前記工程（ｄ）において、前記工程（ｃ）で得られた培養液にさらに界面活性剤を添加する、請求項１または２に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
【請求項６】
前記ポリヒドロキシアルカン酸が、３－ヒドロキシブチレート繰り返し単位およびその他のヒドロキシアルカノエート単位を含む共重合体であり、当該共重合体中の３－ヒドロキシブチレート単位／その他のアルカノエート単位の組成比が、７０／３０～８８／１２（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である、請求項１または２に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
【請求項７】
前記無機酸化物は、過酸化水素またはオゾンである、請求項１または２に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。

発明の詳細な説明【技術分野】
【０００１】
本発明は、ポリヒドロキシアルカン酸の製造方法に関する。
続きを表示（約 2,300 文字）【背景技術】
【０００２】
ポリヒドロキシアルカン酸（以下、「ＰＨＡ」と称する場合がある。）は、生分解性を有することが知られおり、近年、環境配慮の観点から、生分解性プラスチックとして利活用が図られている。
【０００３】
微生物が生成するＰＨＡは、微生物の菌体内に蓄積されるため、ＰＨＡをプラスチックとして利用するためには、微生物の菌体内からＰＨＡを分離・精製する工程が必要となる。ＰＨＡを分離・精製する工程では、ＰＨＡ以外の生物由来成分を可溶化した後、得られた水性懸濁液から、遠心分離、ろ過、乾燥等の分離操作により、ＰＨＡを回収する。このような微生物菌体からのＰＨＡの回収に係る技術として、例えば、特許文献１および２に記載の技術が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
国際公開第２０２３／０２１８７８号公報
国際公開第２０２３／１４００９７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上述した従来技術は優れたものであるが、ＰＨＡの水性懸濁液中での凝集の抑制と、水性懸濁液からのＰＨＡの分離性とを両立する観点からは、改善の余地があった。
【０００６】
上記のような状況にあって、本発明の一態様は、ＰＨＡの水性懸濁液中での凝集の抑制と、水性懸濁液からのＰＨＡの分離性とを両立させ得る、ＰＨＡの製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、ＰＨＡの製造過程において、ＰＨＡを含有する菌体を含む培養液に対して、無機過酸化物処理、有機過酸化物処理、アルカリ性タンパク質分解酵素処理をこの順で実施することにより、ＰＨＡの水性懸濁液中での凝集の抑制と、水性懸濁液からのＰＨＡの分離性とを両立できることを初めて見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００８】
すなわち、本発明の一態様は、以下の構成を含む。
〔１〕（ａ）ポリヒドロキシアルカン酸を含有する菌体を含む培養液に無機過酸化物を添加する工程、（ｂ）前記工程（ａ）で得られた培養液に有機過酸化物を添加し、当該有機過酸化物の１分間半減期温度以下であって、かつ、０～１００℃の温度で維持する工程、（ｃ）前記工程（ｂ）で得られた培養液にアルカリ性タンパク質分解酵素を添加して、酵素処理を行う工程、（ｄ）前記工程（ｃ）で得られた培養液のｐＨを１０．０～１２．０に調整する工程、および、（ｅ）前記工程（ｄ）で得られたポリヒドロキシアルカン酸の水性懸濁液を遠心分離する工程、を含む、ポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
〔２〕前記工程（ｂ）における、前記有機過酸化物の添加量は、前記工程（ａ）で得られた培養液に含まれるポリヒドロキシアルカン酸１００重量部に対して、０．１～５重量部である、〔１〕に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
〔３〕前記有機過酸化物は、１分間半減期温度が１４０℃以下のパーオキシジカーボネートまたはパーオキシエステルである、〔１〕または〔２〕に記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
〔４〕前記工程（ａ）は、前記無機過酸化物を添加したポリヒドロキシアルカン酸を含有する菌体を含む培養液を、３０～７５℃で維持する工程を含む、〔１〕～〔３〕のいずれか１つに記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
〔５〕前記工程（ｄ）において、前記工程（ｃ）で得られた培養液にさらに界面活性剤を添加する、〔１〕～〔４〕のいずれか１つに記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
〔６〕前記ポリヒドロキシアルカン酸が、３－ヒドロキシブチレート繰り返し単位およびその他のヒドロキシアルカノエート単位を含む共重合体であり、当該共重合体中の３－ヒドロキシブチレート単位／その他のアルカノエート単位の組成比が、７０／３０～８８／１２（ｍｏｌ／ｍｏｌ）である、〔１〕～〔５〕のいずれか１つに記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
〔７〕前記無機酸化物は、過酸化水素またはオゾンである、〔１〕～〔６〕のいずれか１つに記載のポリヒドロキシアルカン酸の製造方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の一態様によれば、ＰＨＡの水性懸濁液中での凝集の抑制と、水性懸濁液からのＰＨＡの分離性とを両立させ得る、ＰＨＡの製造方法を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の一実施形態について以下に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。本発明は、以下に説明する各構成に限定されるものではなく、請求の範囲に示した範囲で種々の変更が可能である。また、異なる実施形態または実施例にそれぞれ開示された技術的手段を組み合わせて得られる実施形態または実施例についても、本発明の技術的範囲に含まれる。さらに、各実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を組み合わせることにより、新しい技術的特徴を形成することができる。なお、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考文献として援用される。また、本明細書において特記しない限り、数値範囲を表す「Ａ～Ｂ」は、「Ａ以上（Ａを含みかつＡより大きい）Ｂ以下（Ｂを含みかつＢより小さい）」を意図する。
（【００１１】以降は省略されています）

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